Salud y Producción Animal
El IBYME integra junto a otros 14 institutos del CONICET la Red de Innovación en Salud y Producción Animal (CONICET).
REDINSPA, Red de Innovación en Salud y Producción Animal (CONICET)
La RED es una nueva modalidad de trabajo que vincula al Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET) con los sectores socio-productivos, coordinando capacidades, con el fin de promover el desarrollo y la transferencia de conocimientos y tecnologías.
Más información: https://saludanimal.conicet.gov.ar/
STANs IBYME asociados:
Código: 13
Grupo
Purificación de ácido ribonucleico (ARN) total
Detalle
Extracción y purificación del ARN celular total de muestras obtenidas por microdisección láser. Se utilizan kits comerciales optimizados para aislar ARN a partir de un número reducido de células. El ARN purificado está en condiciones de ser utilizado en aplicaciones moleculares como RT-PCR, síntesis de sondas de ADN marcadas o amplificación lineal del transcriptoma.
Metodología
Para el tejido congelado se utiliza el kit de extracción y purificación PicoPure RNA (Applied Biosystems). EL ARN purificado se eluye en volumen final de 10 a 50 microlitros y se guarda a -80ºC hasta el momento de su utilización.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 14
Grupo
Purificación de ácido ribonucleico (ARN) total
Detalle
Extracción y purificación del ARN celular total de muestras obtenidas por microdisección láser. Se utilizan kits comerciales optimizados para aislar ARN a partir de un número reducido de células. El ARN purificado está en condiciones de ser utilizado en aplicaciones moleculares como RT-PCR, síntesis de sondas de ADN marcadas o amplificación lineal del transcriptoma.
Metodología
Para el tejido fijado en formalina se utiliza el kit de extracción y purificación Paradise RNA (Applied Biosystems). EL ARN purificado se eluye en volumen final de 10 a 50 microlitros y se guarda a -80ºC hasta su utilización.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 15
Detalle
Rescate, evaluación y procesamiento de información bibliográfica científica sobre el tema requerido.Se utilizan diversas bases de datos bibliográficas tanto públicas como rentadas.
Metodología
Se realizan búsquedas bibliográficas de publicaciones científicas en el tema solicitado. Se analizan las publicaciones rescatadas. Si es necesario se bajan datos arancelados. Se procesa la información y se realiza un meta análisis, se comparan y validan los resultados con bases de datos del país, se homogeneiza la información. Se elabora el informe correspondiente.
Responsable: Dra. Isabel Lacau, Dra. Damasia Becú, Dra. Graciela Díaz, Dra. Isabel García Tornadú
Código: 17
Grupo
Medición de hormonas proteicas y esteroideas de mamiferos por radioinmunoensayo
Detalle
Medición de hormonas proteicas y esteroides en suero de vacas, ovejas y roedores.
Metodología
Radioinmunoensayo (extracción de la hormona con solventes adecuados , hormona tritiada comercial y uso de anticuerpos específicos , con posterior precipitación por carbón dextrán y suspensión en Optiphase).
Responsable: Dra Damasia Becú | Contacto:
Código: 19
Grupo
Medición de hormonas proteicas y esteroideas de mamiferos por radioinmunoensayo
Detalle
Medición de hormonas proteicas y esteroides en suero de vacas, ovejas y roedores.
Metodología
Extracción con ácido etanol, crioprecipitación y neutralización de las muestras . Valoración posterior por RIA. (Las muestras son extraidas con un protocolo de extracción ácido etanólica y luego se hace un RIA tipo proteico).
Responsable: Dra Damasia Becú | Contacto:
Código: 21
Grupo
Microdisección láser | La microdisección por captura láser es una técnica para separar grupos de células con el objetivo de realizar análisis moleculares. El tejido se observa en un microscopio óptico que permite seleccionar las células de interés a través de un monitor interactivo. El sistema de lásers recorta la región seleccionada y la adhiere a una pequeña pieza plástica que captura el tejido. Finalmente se retira la pieza con el tejido para realizar la purificación de biomoléculas.
Detalle
Microdisección por captura láser de alta especificidad en portaobjetos de vidrio. Este tipo de microdisección utiliza CapSure HS que están diseñados para capturar células únicas minimizando la posibilidad de contaminación con material no deseado.
Metodología
El material debe estar deshidratado y montado en portaobjetos comunes sin cargas ni adhesivos. Los cortes de tejido serán de 3 a 15 micras de espesor. La microdisección se realiza utilizando el láser IR y CapSure HS (Applied Biosystems). Una vez terminada se observa la eficiencia y se documenta fotografiando el resultado. El CapSure con el tejido capturado se incuba en solución de extracción.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 22
Grupo
Microdisección láser | La microdisección por captura láser es una técnica para separar grupos de células con el objetivo de realizar análisis moleculares. El tejido se observa en un microscopio óptico que permite seleccionar las células de interés a través de un monitor interactivo. El sistema de lásers recorta la región seleccionada y la adhiere a una pequeña pieza plástica que captura el tejido. Finalmente se retira la pieza con el tejido para realizar la purificación de biomoléculas.
Detalle
Microdisección por captura láser de alta especificidad en portaobjetos con membrana. Este tipo de microdisección combina la especificidad de los CapSure HS con la eficiencia de los portaobjetos con membrana. Es recomendada para células únicas que se adhieren fuertemente al portaobjetos de vidrio.
Metodología
Las muestras deben estar deshidratadas y montados en portaobjetos con membrana de polietileno-naftaleno. Los cortes de tejido pueden ser de 3 a 100 micras de espesor. La microdisección se realiza utilizando los CapSure HS (Applied Biosystems), con captura por láser IR y corte por láser UV. Una vez terminada se observa la eficiencia y se documenta fotografiando el resultado. El CapSure con el tejido capturado se incuba en solución de extracción.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 23
Grupo
Microdisección láser | La microdisección por captura láser es una técnica para separar grupos de células con el objetivo de realizar análisis moleculares. El tejido se observa en un microscopio óptico que permite seleccionar las células de interés a través de un monitor interactivo. El sistema de lásers recorta la región seleccionada y la adhiere a una pequeña pieza plástica que captura el tejido. Finalmente se retira la pieza con el tejido para realizar la purificación de biomoléculas.
Detalle
Microdisección por captura láser estándar en portaobjetos con membrana. Este tipo de microdisección asegura la mayor eficiencia de captura. Está recomendada cuando el material se adhiere fuertemente a los portaobjetos de vidrio.
Metodología
Las muestras deben estar deshidratadas y montados en portaobjetos con membrana de polietileno-naftaleno. Los cortes de tejido pueden ser de 3 a 100 micras de espesor. La microdisección se realiza utilizando los CapSure HS (Applied Biosystems), con captura por láser IR y corte por láser UV. Una vez terminada se observa la eficiencia y se documenta fotografiando el resultado. El CapSure con el tejido capturado se incuba en solución de extracción.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 24
Grupo
Microdisección láser | La microdisección por captura láser es una técnica para separar grupos de células con el objetivo de realizar análisis moleculares. El tejido se observa en un microscopio óptico que permite seleccionar las células de interés a través de un monitor interactivo. El sistema de lásers recorta la región seleccionada y la adhiere a una pequeña pieza plástica que captura el tejido. Finalmente se retira la pieza con el tejido para realizar la purificación de biomoléculas.
Detalle
Microdisección por captura láser estándar en marco metálico con membrana. Este tipo de microdisección se recomienda para cortes que no puedan ser deshidratados o para cultivos celulares.
Metodología
Los cortes de tejido deben estar montados en un marco metálico con membrana de polietileno. El tejido se explora al microscopio y se seleccionan las células o regiones de interés. La microdisección se realiza utilizando los CapSure Macro (Applied Biosystems), con captura por láser IR y corte por láser UV. Una vez terminada se observa la eficiencia y se documenta fotografiando el resultado. El CapSure con el tejido capturado se incuba en solución de extracción.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 25
Detalle
Construcción del gen en el laboratorio para determinar si es capaz de producir la proteina de interés. Una vez obtenida se chequeainvitro en células de glándula mamaria antes de la producción de embriones.
Metodología
Células mamarias bovinas, que responden a prolactina in vitro sintetizando caseína, son transfectadas utilizando lípidos catiónicos con la construcción a testear. Como control de eficiencia de la transfección se hace en paralelo otra con un plásmido que expresa eGFP. Las células se replaquean en LabTek multiwell y se estimulan por 72 hs con PRL. Luego se efectua la IF para caseína para constatar la capacidad de repuesta del ensayo, GFP para la eficiencia de la transfección y de la proteína de interés para determinar su funcionalidad en mama bovina. El Ab específico para la proteína debe ser provisto por el tomador del servicio.
Responsable: Dr. Leonardo Bussmann | Contacto:
Código: 26
Grupo
Tinción de cortes histológicos optimizada para microdisección láser.
Detalle
Tinción de cortes de tejido optimizada para realizar microdisección por captura láser. Este procedimiento se realiza cuando es necesario mejorar la visión de las células y regiones de interés.
Metodología
La tinción se realiza utilizando el kit Histogene (Applied Biosystems), sobre cortes de tejido recién descongelados. Todo el procedimiento se realiza con soluciones y materiales libres de nucleasas y proteasas.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 27
Grupo
Tinción de cortes histológicos optimizada para microdisección láser.
Detalle
Tinción de cortes de tejido optimizada para realizar microdisección por captura láser. Este procedimiento se realiza cuando es necesario mejorar la visión de las células y regiones de interés.
Metodología
La tinción se realiza con el kit Paradise (Applied Biosystems), sobre cortes de tejido recién desparafinados. Todo el procedimiento se realiza con soluciones y materiales libres de nucleasas y proteasas.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 28
Detalle
El objetivo es la obtención de células orgánicas modificadas aptas para la producción de animales transgénicos mediante el método de transferencia nuclear (clonación). Dicho método es el más eficiente para la producción de embriones transgénicos.
Metodología
Se transfectará en forma estable fibroblastos fetales bovinos con las construcción provista mediante el uso de lípidos catiónicos. Las células se plaquearán en una multiwell (P96) a una dilución que resulta en colonias monoclonales u oligoclonales. Se seleccionará por resistencia a neomicina, utilizando G418. Las colonias resistentes serán seleccionadas por su tasa de crecimiento y la presencia del transgen de interés y del promotor de beta-caseína. Los fibroblastos fetales a transfectar y los primers adecuados para la detección del transgén por PCR deben ser provistos por el tomador del servicio.
Responsable: Dr. Leonardo Bussmann | Contacto:
Código: 818
Grupo
Microscopía de fluorescencia | La microdisección por captura láser es una técnica para separar grupos de células con el objetivo de realizar análisis moleculares. El tejido se observa en un microscopio óptico que permite seleccionar las células de interés a través de un monitor interactivo. El sistema de lásers recorta la región seleccionada y la adhiere a una pequeña pieza plástica que captura el tejido. Finalmente se retira la pieza con el tejido para realizar la purificación de biomoléculas.
Detalle
Utilización de microscopía de fluorescecia en el reconocimiento de células o estructuras de interés para microdisección láser.
Metodología
Observación de muestras fluorescentes en el microscopio del sistema de microdisección por captura láser.
Responsable: Dr. Pablo Pomata | Contacto: microdiseccion@ibyme.org.ar
Código: 1421
Detalle
Asesoramiento científico en ingeniería genética de anticuerpos monoclonales recombinantes, quiméricos y humanizados, asesoramiento científico para la generación de líneas celulares productoras de anticuerpos recombinates, y asesoramiento científico para la caracterización y purificación de anticuerpos recombinantes terapéuticos.
Metodología
Se realizan búsquedas bibliográficas de publicaciones científicas y de patentes en el tema solicitado. Se asiste en utilización de herramientas de informática para el diseño de secuencias de sistemas de expresión de anticuerpos monoclonales recombinantes. Se asiste en estrategias para generación de líneas celulares, producción, purificación, caracterización y evaluación de especificidad y actividad biológica in vitro e in vivo de anticuerpos monoclonales recombinantes de uso terapéutico.
Responsable: Dr. Gustavo Helguera | Contacto:
Código: 1475
Grupo
Criopreservación de espermatozoides y recuperación de líneas de ratones | La congelación de espermatozoides para técnicas de fertilización es un recurso para conservar y distribuir líneas de ratones. Provee un reaseguro para la pérdida de colonias por envejecimiento, enfermedades infecciosas o contaminación genética. Este servicio involucra recuperación de espermatozoides murinos a partir de animales vivos o de muestras congeladas y su posterior almacenamiento de manera segura.
Detalle
Obtención de espermatozoides a partir de epidídimos en un medio crioprotector que sustente la posterior capacidad fertilizante de los mismos.
Metodología
Se obtienen espermatozoides murinos a partir de cortes en el cauda epididimario. Los espermatozoides son recuperados en un medio crioprotector, y una vez corroborada la motilidad, son dispuestos en pajuelas y almacenados en nitrógeno líquido.
Responsable: Dra. Débora Cohen | Contacto: criopreservacion@ibyme.org.ar
Código: 1476
Grupo
Criopreservación de espermatozoides y recuperación de líneas de ratones | La congelación de espermatozoides para técnicas de fertilización es un recurso para conservar y distribuir líneas de ratones. Provee un reaseguro para la pérdida de colonias por envejecimiento, enfermedades infecciosas o contaminación genética. Este servicio involucra recuperación de espermatozoides murinos a partir de animales vivos o de muestras congeladas y su posterior almacenamiento de manera segura.
Detalle
Almacenamiento en nitrógeno líquido por el lapso de un año de espermatozoides criopreservados por este servicio (prestación 1) o provenientes de otras fuentes.
Metodología
Se almacenan en tanques con nitrógeno líquido por el lapso de un año las pajuelas conteniendo espermatozoides criopreservados por este servicio (prestación 1) o provenientes de otras fuentes.
Responsable: Dr. Diego Gelman | Contacto: criopreservacion@ibyme.org.ar
Código: 1477
Grupo
Criopreservación de espermatozoides y recuperación de líneas de ratones | La congelación de espermatozoides para técnicas de fertilización es un recurso para conservar y distribuir líneas de ratones. Provee un reaseguro para la pérdida de colonias por envejecimiento, enfermedades infecciosas o contaminación genética. Este servicio involucra recuperación de espermatozoides murinos a partir de animales vivos o de muestras congeladas y su posterior almacenamiento de manera segura.
Detalle
Obtención de embriones mediante la realización de ensayos de fertilización in vitro utilizando espermatozoides frescos o congelados. Posterior transferencia de los embriones obtenidos a hembras receptivas.
Metodología
Se realizan ensayos de fertilización in vitro utilizando espermatozoides frescos o criopreservados y ovocitos murinos obtenidos en nuestro bioterio. Los embriones obtenidos son transferidos a úteros de hembras pseudopreñadas alojadas en nuestro bioterio.
Responsable: Dra. Patricia Cuasnicú | Contacto: criopreservacion@ibyme.org.ar
Código: 2131
Grupo
Caracterización del perfil de glicosilación en macro moléculas de interés biológico | La glicosilación es una modificación post-traduccional frecuente; en eucariontes más del 50% de las proteínas están glicosiladas. Esta modificación suscitó interés en el ámbito industrial al tiempo que diversas glicoproteínas (ej: anticuerpos monoclonales) comenzaron a usarse como bioterapéuticos. Ofrecemos una plataforma para análisis estructural de glicanos (Glicómica) por cromatografía liquida de ultra performance (UPLC), proveyendo una visión integrada de la/s macromolécula/s de interés
Detalle
Análisis de la glicosilación por porcentaje de monosacáridos, a saber: Hexosaminas (provenientes de N-acetilhexosaminas), Galactosa, Manosa, Glucosa, Xilosa, y Fucosa.
Metodología
Los glicanos presentes en una muestra se hidrolizan con ácidos (trifluoracético y/o clorhídrico) para luego ser derivatizados con una etiqueta fluorescente (2-aminobenzoico) y caracterizados contra patrones estandard por cromatografía líquida de ultra-performance.
Responsable: Dra. Karina Mariño | Contacto:
Código: 2132
Grupo
Caracterización del perfil de glicosilación en macro moléculas de interés biológico | La glicosilación es una modificación post-traduccional frecuente; en eucariontes más del 50% de las proteínas están glicosiladas. Esta modificación suscitó interés en el ámbito industrial al tiempo que diversas glicoproteínas (ej: anticuerpos monoclonales) comenzaron a usarse como bioterapéuticos. Ofrecemos una plataforma para análisis estructural de glicanos (Glicómica) por cromatografía liquida de ultra performance (UPLC), proveyendo una visión integrada de la/s macromolécula/s de interés
Detalle
Análisis de los datos, obteniéndose resultados de relevancia para bioterapéuticos como son: fucosilación, manosilación, galactosilación, antenaridad, sialilación, distribución de G0, G1, G2.
Metodología
Glicómica funcional y molecular: caracterización estructural de glicanos como una herramienta esencial para comprender el papel de la glicosilación en diversos procesos biológicos. En los últimos años se han logrado importantes avances en el campo de la glicoanalítica, que permiten no sólo el estudio detallado de las modificaciones post-traduccionales de proteínas (N- y O-glicanos de membrana celular, de suero y glicanos libres en otros fluidos corporales) y es de utilidad en varias disciplinas biomédicas. La glicoanalítica hoy en día cuenta con varias tecnologías disponibles: la caracterización de glicanos derivatizados (fluorescentes) por cromatografía líquida de interacción hidrofílica (HPLC/UPLC-HILIC) permite la caracterización detallada de las estructuras presentes en una muestra determinada. Esta es una de las técnicas más sensibles para la caracterización estructural de posibles cambios en los perfiles de glicosilación, detectando glicanos en el orden de femtomoles, y se basa en la liberación enzimática y/o química de los glicanos y su posterior marcación fluorescente. Este proceso ha sido optimizado para procesamiento de muestras de N- y también O-glicanos con alta eficiencia y es aplicable a gran número de muestras, adaptado en formato de placas de 96 pocillos.
Responsable: Dra. Karina Mariño | Contacto:
Código: 2133
Grupo
Caracterización del perfil de glicosilación en macro moléculas de interés biológico | La glicosilación es una modificación post-traduccional frecuente; en eucariontes más del 50% de las proteínas están glicosiladas. Esta modificación suscitó interés en el ámbito industrial al tiempo que diversas glicoproteínas (ej: anticuerpos monoclonales) comenzaron a usarse como bioterapéuticos. Ofrecemos una plataforma para análisis estructural de glicanos (Glicómica) por cromatografía liquida de ultra performance (UPLC), proveyendo una visión integrada de la/s macromolécula/s de interés
Detalle
Estudio de la sialilación de la muestra en estudio, con resultados sobre porcentajes de especies mono, di, tri y tetra sialiladas para N-glicanos.
Metodología
La caracterización estructural de glicanos se realiza por liberación enzimática y/o química de los mismos, y su posterior marcación fluorescente. Los glicanos así tratados son analizados por cromatografía líquida de intercambio aniónico (WAX), con el objeto de establecer el porcentaje de glicanos cargados negativamente. Los sialilados se diferencian de los sulfatados y/o fosfatados por sialidasas específicas.
Responsable: Dra. Karina Mariño | Contacto:
Código: 2134
Grupo
Caracterización del perfil de glicosilación en macro moléculas de interés biológico | La glicosilación es una modificación post-traduccional frecuente; en eucariontes más del 50% de las proteínas están glicosiladas. Esta modificación suscitó interés en el ámbito industrial al tiempo que diversas glicoproteínas (ej: anticuerpos monoclonales) comenzaron a usarse como bioterapéuticos. Ofrecemos una plataforma para análisis estructural de glicanos (Glicómica) por cromatografía liquida de ultra performance (UPLC), proveyendo una visión integrada de la/s macromolécula/s de interés
Detalle
Análisis estructural completo del glicoma asociado a una muestra, obteniéndose datos de relevancia para bioterapéuticos como son: fucosilación, manosilación, galactosilación, sialilación (porcentajes de especies mono, di, tri y tetra sialiladas para N-glicanos), antenaridad. En el caso de anticuerpos monoclonales, se informa, entre otros, distribución de G0, G1, G2.
Metodología
La caracterización estructural de glicanos se realiza por liberación enzimática y/o química de los mismos, y su posterior marcación fluorescente. Los glicanos así tratados son analizados por cromolitografía líquida de intercambio aniónico (WAX), con el objeto de establecer el porcentaje de glicanos cargados negativamente. Los sialilados se diferencian de los sulfatados y/o fosfatados por sialidasas especificas. Para un análisis estructural completo, la muestra también es analizada por cromatografía líquida de interacción hidrofílica (HPLC/UPLC-HILIC). Esta es una de las técnicas más sensibles para la caracterización estructural de posibles cambios en los perfiles de glicosilación, detectando glicanos en el orden de femtomoles, y además es cuantitativa ya que la señal es directamente proporcional a la aglicona fluorescente. Para complementar los datos cromatográficos se realizan ademas digestiones con glicosidasas específicas, que aportan información esencial sobre los enlaces glicosídicos presentes en la muestra.
Responsable: Dra. Karina Mariño | Contacto:
Código: 2135
Grupo
Caracterización del perfil de glicosilación en macro moléculas de interés biológico | La glicosilación es una modificación post-traduccional frecuente; en eucariontes más del 50% de las proteínas están glicosiladas. Esta modificación suscitó interés en el ámbito industrial al tiempo que diversas glicoproteínas (ej: anticuerpos monoclonales) comenzaron a usarse como bioterapéuticos. Ofrecemos una plataforma para análisis estructural de glicanos (Glicómica) por cromatografía liquida de ultra performance (UPLC), proveyendo una visión integrada de la/s macromolécula/s de interés
Detalle
Análisis estructural completo del glicoma asociado a una muestra, obteniéndose datos de relevancia para bioterapéuticos como son: fucosilación, manosilación, galactosilación, antenaridad. En el caso de anticuerpos monoclonales, se informa, entre otros, abundancia de G0, G1, G2.
Metodología
La caracterización estructural de glicanos se realiza por liberación enzimática y/o química de los mismos, y su posterior marcación fluorescente. Los glicanos así tratados son analizados por cromatografía líquida de interacción hidrofílica (HPLC/UPLC-HILIC). Esta es una de las técnicas más sensibles para la caracterización estructural de posibles cambios en los perfiles de glicosilación, detectando glicanos en el orden de femtomoles, y además es cuantitativa ya que la señal es directamente proporcional a la aglicona fluorescente. Para complementar los datos cromatográficos se realizan además digestiones con glicosidasas específicas, que aportan información esencial sobre los enlaces glicosídicos presentes en la muestra.
Responsable: Dra. Karina Mariño | Contacto:
Código: 2136
Grupo
Caracterización del perfil de glicosilación en macro moléculas de interés biológico | La glicosilación es una modificación post-traduccional frecuente; en eucariontes más del 50% de las proteínas están glicosiladas. Esta modificación suscitó interés en el ámbito industrial al tiempo que diversas glicoproteínas (ej: anticuerpos monoclonales) comenzaron a usarse como bioterapéuticos. Ofrecemos una plataforma para análisis estructural de glicanos (Glicómica) por cromatografía liquida de ultra performance (UPLC), proveyendo una visión integrada de la/s macromolécula/s de interés
Detalle
Caracterización de ácidos siálicos presentes en la muestra, incluyendo porcentaje de N-acetilneuramínico (NANA), N-glicolilneuraminico (NGNA) y especies acetiladas.
Metodología
La especiación de ácidos siálicos se realiza por liberación química de los mismos, y su posterior marcación fluorescente con 1,2-diamino-4,5-metilendioxibenceno dihidrocloruro (DMB). Los glicanos así tratados son analizados contra patrones por cromatografía liquida de fase reversa (UPLC-FLR). Esta es una de las técnicas más sensibles y además es cuantitativa ya que la señal es directamente proporcional a la aglicona fluorescente.
Responsable: Dra. Karina Mariño | Contacto:
