El nuevo reactivo desarrollado busca conseguir un diagnóstico más eficiente de una enfermedad que constituye un problema sanitario del ganado argentino.
La tuberculosis bovina es una enfermedad infectocontagiosa causada por la bacteria Mycobacterium bovis, que puede transmitirse por vía respiratoria o por ingestión de agua o leche contaminada. Se trata de una problemática que acarrea importantes consecuencias negativas en la fertilidad y la producción de leche del ganado, con las pérdidas económicas que ello implica, y también en la salud pública, ya que puede transmitirse a humanos.
Por este motivo, es imperativo detectar tempranamente casos positivos de tuberculosis bovina y separar a los animales infectados del resto del ganado. Para esto, se utilizan tradicionalmente pruebas cutáneas intradérmicas basadas en un Derivado Proteico Purificado de la bacteria (PPD-B), que reacciona en presencia de la bacteria.
Si bien se trata del método estándar actualmente utilizado en nuestro país, su uso tiene limitaciones y problemas, ya que su composición no está completamente definida, puede presentar variabilidad entre lotes y su producción es relativamente costosa porque requiere altos niveles de bioseguridad debido al cultivo del microorganismo patógeno.
En este contexto, el laboratorio de Biotecnología Farmacéutica del IBYME, liderado por Gustavo Helguera, publicó una investigación basada en un método alternativo de testeo y detección de tuberculosis bovina, basado en un reactivo recombinante, diseñado y generado por el grupo.
“Nuestro laboratorio tiene experiencia en el diseño de reactivos biotecnológicos innovadores y cuenta con una plataforma para su producción, a partir de lo cual establecimos un vínculo con la empresa Agropharma Salud Animal S.A., que había identificado una problemática importante en el diagnóstico de la tuberculosis bovina”, señala Gustavo Helguera, y explica que en nuestro Instituto se llevó adelante el diseño molecular del reactivo recombinante, su producción en bacterias a escala de laboratorio, los procesos de purificación y su caracterización bioquímica, además de desarrollar la formulación del reactivo utilizada en los ensayos experimentales en cobayos y bovinos.
“Esto implicó una serie de desafíos, necesitábamos desarrollar un sistema de producción de la proteína recombinante que permitiera obtenerla de manera estable y funcional, y que además pudiera escalarse con vistas a una eventual transferencia de tecnología al sector productivo”, detalla Matías Gatto, primer autor de la publicación, y agrega que “también fue necesario coordinar ensayos en modelos animales, comparar el desempeño del reactivo con el estándar de diagnóstico actual y su evaluación clínica en bovinos en un entorno relevante”.
El reactivo recombinante desarrollado, denominado RRbTB-E, fue evaluado tanto en modelos animales de laboratorio como en un escenario clínico relevante de ganado bovino infectado naturalmente, y los resultados obtenidos aportan evidencia para el desarrollo de estas nuevas herramientas diagnósticas basadas en proteínas recombinantes.
“Observamos que este reactivo genera respuestas comparables a las producidas por la tuberculina estándar PPD-B.”, explica Helguera, y concluye que “los resultados obtenidos representan un primer paso en la evaluación de reactivos recombinantes para el diagnóstico de tuberculosis bovina, pero será necesario realizar estudios con un mayor número de animales y en distintas condiciones de campo para evaluar con mayor precisión su desempeño diagnóstico y explorar posibles mejoras del reactivo”.
Este proyecto de vinculación se desarrolla en el marco de una articulación público-privada entre CONICET y la empresa Agropharma Salud Animal S.A., permitiendo combinar el conocimiento y desarrollo tecnológico de nuestro sistema científico con el aporte de la empresa para realizar los estudios con animales, aportar la infraestructura productiva y el camino regulatorio necesario para que estas innovaciones puedan transformarse en productos concretos.
El estudio contó con la participación de un equipo interdisciplinario de investigadores y profesionales, en particular Claudio Paolazzi (Agropharma Salud Animal S.A.) y Claudia Argüelles (INPB, ANLIS-Malbrán), quienes participaron directamente en las distintas etapas del proyecto. Asimismo, se reconocen las contribuciones de Sol Ferrero (IBYME) en la purificación de la proteína recombinante; de Marcela Desio y Gerardo Rodríguez (INPB, ANLIS-Malbrán) en la evaluación en cobayos; de Bernardo Alonso (SENASA) y de Fernando Martino y Florencia Tonini (Suardi, provincia de Santa Fe), quienes colaboraron en la evaluación del reactivo en bovinos.
Diagrama de las etapas clave en el desarrollo del reactivo recombinante RRbTB-E: desde la generación de la bacteria recombinante y su cultivo en laboratorio, hasta la purificación de la proteína, evaluación preclínica en cobayos y validación a campo en bovinos por prueba cutánea de hipersensibilidad retardada (RHR).
Sobre publicación:
Evaluation of an ESAT-6 Recombinant Skin Test Reagent for Bovine Tuberculosis Diagnosis in Guinea Pigs and Cattle
Matías Iván Gatto, Sol Ferrero, Florencia Tonini, Marcela Desio, Gerardo Rodríguez, Fernando Martino, Bernardo Alonso, Claudio Paolazzi, Claudia Argüelles, Gustavo Helguera
