Citometría de Flujo

La citometría de flujo es una técnica que permite medir características de las células, es decir, medir determinadas propiedades de las mismas a través de la luz que emiten, habiendo sido previamente marcadas con sondas o anticuerpos con moléculas excitables por láseres. Las células se miden en un fluido que, inyectado a una determinada presión, adquiere las características de un flujo laminar y mediante las señales lumínicas producidas se generan dos tipos de parámetros, de fluorescencia y físicos (dispersión de la luz). Esta información lumínica es compilada por detectores de fluorescencia que amplifican estas señales (fotomultiplicadores), que en sí son débiles, y luego son procesadas por el software del equipo, el Facs Diva.

En el STAN de citometría de flujo se provee asistencia técnica a todos los usuarios del servicio que lo requieran tanto en la preparación de sus respectivas muestras, como en el armado de paneles multicolor (es decir, cuando se miden varios parámetros de fluorescencia), como en la adquisición de las muestras, y eventualmente, en el análisis de los resultados para quien lo requiera. Los resultados son subidos a la cuenta del servicio y la carpeta resultante es compartida por red con el propietario del experimento.

Beckton Dickinson – Facs Canto II

Beckton Dickinson - Facs Canto II

Características:

El citómetro de flujo que posee el STAN del IBYME es un Facs Canto II de BD (Beckton Dickinson) que mide hasta 8 colores, es decir, 8 señales de fluorescencia con 3 láseres: azul (488 nm, con flitros de 780/60, 670 LP, 585/42 y 530/30), rojo (633 nm, con filtros 660/20 y 780/60) y violeta (405 nm con flitros 450/50 y 510/50), pudiendo medir hasta 4 señales por el laser azul y hasta 2 por el laser rojo y otras dos por el violeta. A esto se suman los dos parámetros físicos que siempre se miden en toda muestra como son el tamaño (FSC Forward Side Scatter) y la complejidad interna (SSC Side Scatter) de las células presentes en la muestra.

STANs asociados:

Código: 2012

Detalle
El servicio consiste en la utilización del citómetro de flujo para corrida de muestras inmunomarcadas para ciclo celular y teñidas con colorantes fluorescentes para el conteo de células y análisis de datos. El equipo cuenta con dos láseres, verde y azul, que interaccionan células en suspensión sometidas a marcaciones por inmunoflurescencia directa, indirecta o reacciones con colorantes fluorescentes. El sistema óptico y electrónico toma datos de cada célula.

Metodología
El usuario realiza las marcaciones con técnicas convencionales, teniendo que estar las células en suspensión. Estas son inmunofluorescencia directa e indirecta con anticuerpos monoclonales o policlonales, incubación de células con colorantes, etc. Cada muestra cuenta con un número determinado de tubos. Estos son pasados por el equipo y posteriormente los datos de cada tubo de una muestra son procesados y analizados.

Responsable: Dr. Alejandro Benatar | Contacto: ibyme.citometria@gmail.com

Contacto

Dirección
Vuelta de Obligado 2490
(1428) CABA. Argentina

Telefono
+54 11 4783-2869